पीवीपी जलीय घोल पर पाइरोलिडोन के पीएच मान और तापमान का प्रभाव कोशिका बीज संरक्षण में एक भूमिका निभाता है। उचित संचालन और उपयुक्त ठंड की स्थिति कोशिका विशेषताओं के परिवर्तन या हानि को कम कर सकती है। अनक्रॉस-लिंक्ड पीवीपी समाधान में कोई विशेष थिक्सोट्रॉपी नहीं है, जब तक कि यह उच्च सांद्रता में थिक्सोट्रोपिक न हो और बहुत कम विश्राम समय दिखाता हो। सेल फ़्रीज़िंग में अनुभव: सही फ़्रीज़िंग टूल चुनना सबसे अच्छा तरीका है। सेल फ़्रीज़िंग एक ऐसी तकनीक है जो कोशिकाओं को कम तापमान वाले वातावरण में संग्रहीत करती है, कोशिका चयापचय को कम करती है और दीर्घकालिक भंडारण प्राप्त करती है। (पाइरोलिडोन) अधिकांश कोशिका रेखाओं में, पीवीपी का गाढ़ा होने का प्रदर्शन इसके सापेक्ष आणविक द्रव्यमान से निकटता से संबंधित होता है। दी गई सांद्रता स्थितियों के तहत, सापेक्ष आणविक द्रव्यमान जितना बड़ा होगा, इसकी चिपचिपाहट उतनी ही अधिक होगी। कोशिकाएं उम्र बढ़ने और विकास के साथ जमा होती रहेंगी और बदलती रहेंगी, जिससे फेनोटाइप और जीनोटाइप का "संस्कृति बहाव" होगा। सही और सफल फ्रीजिंग कोशिकाओं के दीर्घकालिक अनुप्रयोग में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है।
इसलिए, जमने की प्रक्रिया के दौरान, सही संस्कृति और कोमल कोशिका संग्रह, जमने से पहले, कोशिकाओं को सबसे अच्छी वृद्धि अवस्था (लघुगणकीय या घातीय चरण में) बनाए रखनी चाहिए। आदर्श रूप से, कटाई से 24 घंटे पहले कल्चर मीडियम को बदल देना चाहिए। यह सुनिश्चित करने के लिए कि कोशिकाएं दूषित न हों, माइक्रोबियल संदूषकों, विशेष रूप से माइकोप्लाज्मा के लिए कल्चर की जांच करने की सिफारिश की जाती है। कोशिका संग्रह प्रक्रिया के दौरान, कोशिका क्षति से बचने के लिए प्रयोगात्मक कार्रवाई यथासंभव कोमल होनी चाहिए। (पाइरोलिडोन) उपयुक्त क्रायोप्रोटेक्टेंट। वर्तमान में, सेल फ्रीजिंग के लिए आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक तरल नाइट्रोजन क्रायोप्रिजर्वेशन है, जो मुख्य रूप से कोशिकाओं को फ्रीज करने और फ्रीजिंग प्रक्रिया के दौरान कोशिकाओं को होने वाले नुकसान को कम करने के लिए उचित मात्रा में सुरक्षात्मक एजेंट के साथ धीमी फ्रीजिंग विधि का उपयोग करती है। यदि कोशिकाओं को सुरक्षात्मक एजेंट के बिना सीधे जमे हुए किया जाता है, तो कोशिकाओं के अंदर और बाहर का पानी तेजी से बर्फ के क्रिस्टल बना देगा, जिससे प्रतिकूल प्रतिक्रियाओं की एक श्रृंखला होगी।
पॉलीविनाइल पाइरोलिडोन, एथिलीन ग्लाइकॉल, मेथनॉल और मिथाइलएसिटामाइड सभी क्रायोप्रोटेक्टेंट हैं। डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड (डीएमएसओ) और ग्लिसरॉल सेल क्रायोप्रिजर्वेशन में आम हैं। इन दोनों पदार्थों में छोटे आणविक भार, उच्च घुलनशीलता होती है और ये आसानी से कोशिकाओं में प्रवेश कर सकते हैं। वे हिमांक को कम कर सकते हैं और पानी के प्रति कोशिका झिल्ली की पारगम्यता को बढ़ा सकते हैं। कुंजी कोशिका प्रकृति में निहित है। (पाइरोलिडोन) डीएमएसओ में आमतौर पर 5-10% (v/v) की सांद्रता होती है, और इष्टतम सांद्रता विभिन्न सेल लाइनों के साथ भिन्न होती है। हिमीकरण माध्यम में ग्लिसरॉल की अंतिम सांद्रता 5-15% है। इसी प्रकार, इष्टतम सांद्रता कोशिका रेखा पर निर्भर करती है। उन कोशिकाओं की जीवित रहने की दर को बढ़ाने के लिए जिन्हें संरक्षित करना मुश्किल है, आप क्रायोप्रिजर्वेशन के दौरान संरक्षण समाधान में सीरम एकाग्रता को बढ़ाने का विकल्प चुन सकते हैं। यदि आप कोशिकाओं को तेजी से और अधिक स्थिरता से फ्रीज करना चाहते हैं, तो सेल फ्रीजिंग समाधान एक अच्छा विकल्प होगा। किसी तैयारी की आवश्यकता नहीं है. बस कोशिकाओं में उचित मात्रा में फ्रीजिंग घोल डालें। ऑपरेशन सरल है और आपके पास उच्च व्यवहार्यता वाली कोशिकाएँ हो सकती हैं।
